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高效液相色谱仪,大型离子色谱仪,生物酶色谱仪,蛋白质氨基酸色谱仪 |
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高效液相色谱仪的紫外可见光检测器是基于Lambert-Beer定律,根据被测组分对紫外光或可见光具有吸收,且吸收强度与组分浓度成正比的关系进行检测。很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团,有较强的紫外或可见光吸收能力,因此紫外可见光检测器灵敏度较高,应用广泛。由于紫外可见光检测器对环境温度、流速和流动相组成等变化不是很敏感,能用于梯度淋洗。紫外可见光检测器检测方式有直接紫外检测、间接紫外检测和柱后衍生化光度检测等。
一、直接紫外检测:
所使用的流动相为在检测波长下无紫外吸收的溶剂,检测器直接测定被测组分的紫外吸收强度。
多数情况下采用直接紫外检测。
二、间接紫外检测:
使用具有紫外吸收的溶液作为流动相,间接检测无紫外吸收的组分。
在离子色谱中使用较多,如以具有紫外吸收的邻苯二甲酸氢钾溶液作为阴离子分离的流动相,当无紫外吸收的无机阴离子被洗脱到流动相中时,会使流动相的紫外吸收减小。
三、柱后衍生化光度检测:
对于可以与显色剂反应生成有色配合物的组分(过渡金属离子和氨基酸等),可以在组分从色谱柱中洗脱出来之后与合适的显色剂反应,在可见光区检测生成的有色配合物。
使用紫外可见