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高效液相色谱应用实例
《高效液相色谱应用实例》由南京科捷分析仪器有限公司提供！
例1．植物甾醇分析（生物制药）
样 品：含β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、菜籽甾醇和胆固醇的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：Alltech 2000型 ELSD蒸发光散射检测器
漂移管温度为
色谱柱：Supecol Discouery C18 , 5μm，柱长25cm ，柱径4.6mm
流动相：甲醇
流 速：1mL/min
进 样：10μL
结 果：所有组分在19min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为菜籽甾醇保留时间13.70min，峰2为胆固醇保留时间14.62 min，峰3为豆甾醇保留时间15.45min，峰4为菜油甾醇保留时间15.97min，峰5为β-谷甾醇保留时间17.05min。
例2．甾族化合物分析
样 品：含孕酮等4种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，四元梯度泵，色谱工作站
检测器：Mark ⅡA型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为135℃，氮气流速为1.2L/min。
色谱柱：Hyperil C18 ,5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇:水 = 70:30
流 速：1.2mL/min
进 样：20μL
结 果：所有组分在12min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为氢化可的松，峰2 为强的松，峰3为睾酮，峰4为孕酮。
例3．皮质醇分析
样 品：含皮质醇等5种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：荧光检测器，流动池30μL
激发波长370nm ,检测波长480nm，狭缝均为20nm
色谱柱：Finepak C18 ，10μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇:水 = 50:100(v/v)
流 速：0.8 mL/min
进 样：20μL
结 果：所有组分70min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为皮质醇保留时间15.8min，峰2为β-Methasone保留时间20.0min，峰3为四氢皮质酮保留时间22.5min，峰4为四反皮质醇保留时间32.5 min，峰5为四氢-11-脱氧皮质醇保留时间65.8min。
例4．胆固醇分析
样 品：含胆固醇等6组分的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：ELSD美国Alltech MKⅢ蒸发激光散射检测器
漂移管温度为65℃，氮气流速为2.0L/min。
色谱柱：Allsphere Silica ，3μm，柱长10cm，柱径4.6mm
流动相：A为离子对试剂，B为正己烷，C为水
梯 度：时间 0min 7min 15min
A 58% 52% 52%
B 40% 40% 40%
C 2% 8% 8%
流 速：1.25mL/min
进 样：20μL
结 果：所有组分在13min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为胆固醇，峰2为棕榈酸，峰3为磷脂酰乙醇胺，峰4为磷脂酰丝氨酸，峰5为磷脂酰胆碱，峰6为神经鞘磷脂。
例5．磷脂分析（生物）
样 品：含磷脂酰肌醇等4种物质混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，四元梯度泵，色谱工作站
检测器：500型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为120℃，氮气流速为2.7L/min。
色谱柱：Rosil NH2 ，5μm，柱长15cm，柱径4.6mm
流动相：A为无水乙醇，B为0.2mol/L的草酸溶液
梯 度：时间 0min 15min 30min 30.1min 35.1min
A 95% 85% 85% 95% 95%
B 5% 15% 15% 5% 5%
流 速：1.5mL/min
进 样：10μL
结 果：所有组分在35min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为磷脂酰乙醇胺, 峰2为磷脂酰丝氨酸, 峰3为磷脂酰胆碱, 峰4为磷脂酰肌醇。
例6．多肽分析（生物）
样 品：含G-Y等3种多肽物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：ELSD美国Alltech MKⅢ蒸发激光散射检测器
漂移管温度为110℃，氮气流速为2.19L/min
色谱柱：AlltimaTM C18 ，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：0.05%TFA水溶液:乙腈 = 65:35
流 速：0.6mL/min
进 样：20μL
结 果：所有组分在5min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为G-Y，峰2为G-L-Y，峰3为K-D。
例7．维生素分析（食品分析）
样 品：含维生素A等5种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有工作站
检测器：500型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为70℃，氮气流速为2.0L/min
色谱柱：Adsorbosphere C18 ，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇:乙醇 = 97:3
流 速：1mL/min
进 样：20μL
结 果：所有组分在21 min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为维生素A，峰2为维生素D2，峰3为维生素D3，峰4为维生素E，峰5为维生素K1 。
例8．抗菌素分析（药物）
样 品：含有红霉素等5种抗菌素的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器，Rheadyane 77251进样阀，HP化学工作站
检测器：2000型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为95℃，氮气流速为2.0L/min
色谱柱：AlltimaTM C18 ,5μm，柱长15cm，柱径4.6mm
流动相：A为0.2% 五氟丙酸, B为甲醇
梯 度：时间 0min 5min
A/B 55%/45% 35%/65%
流 速：1mL/ min
进 样：10μL
结 果：所有组分在6min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为红霉素，峰2为链霉素，峰3为托布霉素，峰4为阿米卡星，峰5为新霉素。
例9．无活菌素分析（生物制药）
样 品：含无活菌素等5种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器，Rheadyane 77251进样阀，HP化学工作站
检测器：2000型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为96℃，氮气流速为2.9L/min
色谱柱：AlltimaTM C18 ,5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：THF:水 = 60:40
流 速：1mL/min
进 样：20μL
结 果：所有组分在20min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为无活菌素，峰2为单活菌素，峰3为二活菌素，峰4为三活菌素，峰5为四活菌素。
例10．非离子型去垢剂分析（化学化工）
样 品：3种非离子型去垢剂物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：2000型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为65℃，氮气流速为1.9L/min
色谱柱：Alltech EconosphereTM C18 ,5μm，柱长15cm，柱径4.6mm
流动相：甲醇:水 = 90:10
流 速：0.8mL/min
进 样：20μL
结 果：所有组分在5 min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为n-葵基-β-D-吡喃葡萄糖甙，峰2为n-十二烷基-β-D-吡喃葡萄糖甙，峰3为n-辛葵基-β-D-吡喃葡萄糖甙。
南京科捷分析仪器有限公司专业生产、提供销售气相色谱仪，液相色谱仪，色谱配套产品，色谱配件。
公司网站：http://www.kj17.com ,http://www.kj17.net 。
高效液相色谱应用实例
