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- 反相色谱柱是一种常用的色谱分离技术，它基于样品中各组分与固定相和流动相间作用力的差别进行洗脱分离。这种色谱柱具有操作简便、分离能力强、测定结果准确等优点，广泛应用于天然药物、化学合成药物及生化制品等的定性、定量分析和质量控制。
反相色谱柱通常以硅胶为载体，键合有极性相对较弱的官能团的填料所组成的色谱柱。目前，用作固定相的化学键合硅胶主要有十八烷基（C18或ODS，Octadecylsilyl）、辛基（C8）和苯基（Phenyl）3种。
反相色谱法之所以成为液相色谱的支柱是由于它具有如下优点：可使用广泛的有机溶剂作为流动相；分析速度快；可使用小粒径填料，提高了柱效，降低了检测限；样品可以回收；容易实现梯度淋洗；分析对象广泛，从极性化合物到非极性化合物均可分析。
反相色谱柱的选择主要依据两项指标：碳载量和疏水性。碳载量是指填料表面键合的有机官能团数量。碳载量直接关系到反相色谱的疏水性。碳载量越高，疏水性越强，相应的容量因子越大，对疏水性物质的保留和分离能力越强。因此，在需要良好分离效果时选择高碳载量的色谱柱是非常必要的。
在选择反相色谱柱时，还需要考虑pH耐受范围和温度耐受范围。硅胶载体的反相色谱柱仅能在pH=2~8范围内使用（<80℃）。而杂化填料和聚合物填料可以在较宽的pH范围内使用。此外，在选择色谱柱时还需要考虑分析物的性质、分子量、溶解度以及基质等因素。
反相色谱柱
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