lucigen EX4425K 25000 U Exonuclease III

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产品名称:Exonuclease III

货号:EX4425K

规格:25,000 U @ 200 U/μl

存储温度:-20℃

lucigen EX4425K 25000 U Exonuclease III, E. coli 产品描述
应用说明

• 生产定点诱变的中间产物。1-3
• 生产链特异性标记的探针。4

外切酶II从I3'→5'消化双链DNA形成一个缺口，一个平端，或3'-端凹进末端，在相对链产生单链DNA。5,6在指定的反应条件下，通过核酸外切酶III降解的DNA形成可预测和可重复的消化结果。
因为由脱氧核糖核酸外切酶III的核酸切除的速率取决于反应的因素，包括温度，离子强度，模板序列和酶与DNA的比例，4,7每个模板用样品消化来进行优化，以达到预期的切除率。
核酸外切酶III在以下情况下不具有活性，3'-端突出4个碱基或以上的长度，单链DNA，或硫酯连接的核苷酸，酶也具有固有的RNA酶H，3'-DNA的磷酸酶，和脱嘌呤核酸内切酶活性。
单位定义：外切核酸酶III的一个单位定义为标准条件下，37℃30分钟，从双链小牛胸腺DNA催化释放1nmol的酸溶核苷酸所需要的酶量。
储存缓冲液： 50mM的Tris-HCl（pH 7.5）含50％甘油，0.1M的NaCl，0.1mM的EDTA，1mM的DTT和0.1％的Triton?X-100。
外切酶III 10X反应缓冲液： 330毫摩尔Tris-醋酸盐（pH 7.5），660 mM的醋酸钾，100mM的醋酸镁，和5mM DTT。
质量控制：外切核酸酶III未检测到外源性核糖核酸酶，核酸内切酶和单链核酸外切酶的活性。
 

参考文献

• Sambrook, J. et al. (1989) in: Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd ed.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York.
• Vandeyar, M.A. (1988) Gene 65, 129.
• Luckow, B. et al. (1987) Nucleic Acids Res. 15, 417.
• Richardson, C.C. et al. (1964) J. Biol. Chem. 239, 251.
• Weiss, B. (1976) J. Biol. Chem. 251, 1896.
• Rogers, S.G. and Weiss, B. (1980) Meth. Enzymol. 65, 201.
• Guo, L.H. and Wu, R. (1982) Nucleic Acids Res. 10, 2065.

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